Artmis.a
New member
روش های اندازه گیری پروتئین ها :
1. کِجلدال یا کلدال :
این روش بسیار قدیمی است. اساس روش کجلدال این است که هر 100gr پروتئین دارای 16gr نیتروژن میباشد و نسبت پروتئین به نیتروژن 6/25 محاسبه می کنند. در این روش با اندازه گیری میزان نیتروژن پروتئین ها و ضرب کردن در عدد 25/6، میزان پروتئین را محاسبه می کنند. معمولا از این روش برای اندازه گیری پروتئین مواد غذایی و گیاهان استفاده میشود.
2. براد فورد :
در این روش ماده ای به نام کوماسی برلیان بلو 250 G با پروتئین ها کمپلکس آبی رنگی تشکیل میدهد که در طول موج 595nm جذب دارد. این روش بسیار دقیق است و میتوان پروتئین تا غلظت 2 را اندازه گیری کرد. این روش معمولا در آزمایشگاه های تحقیقاتی برای سنجش دقیق پروتئین ها استفاده میشود.
3. بیوره :
اساس روش بیوره این است که یون مس دو ظرفیتی ( cu2) در محیط قلیایی با عامل آمین پیوند های پپتیدی، کمپلکس آبی رنگی ایجاد میکند که در طول موج 540nm جذب دارد.
به دلیل اینکه مولکول بیوره نیز همین کمپلکس آبی را با cu2 تشکیل می دهد، این آزمایش بیوره نام دارد.
روش کار :
کیت بیوره دارای یک معرف است که حاوی سود برای قلیایی کردن محیط و سولفات مس برای تأمین مس مورد نیاز برای تشکیل کمپلکس میباشد.
طبق جدول زیر محلول ها را در لوله های آزمایش مخلوط کنید.
محتویات لوله ها را مخلوط کرده و پس از قرار دادن در دمای 37 به مدت 15 دقیقه، جذب لوله های TETS و استاندارد را در مقابل بلانک در طول موج 540nm قرائت میکنیم.
مقدار نرمال پروتئین سرم در نوزادان 9/1 – 5/2gr/dl است. برای بزرگسالان 8/3 – 6/4gr/dlاست. این تست برای غلظت های کمتر از 1gr/dl حساس نیست. بنابراین از آن برای اندازه گیری پروتئین ادرار و مایع نخاعی نمیتوان استفاده کرد.
1. کِجلدال یا کلدال :
این روش بسیار قدیمی است. اساس روش کجلدال این است که هر 100gr پروتئین دارای 16gr نیتروژن میباشد و نسبت پروتئین به نیتروژن 6/25 محاسبه می کنند. در این روش با اندازه گیری میزان نیتروژن پروتئین ها و ضرب کردن در عدد 25/6، میزان پروتئین را محاسبه می کنند. معمولا از این روش برای اندازه گیری پروتئین مواد غذایی و گیاهان استفاده میشود.
2. براد فورد :
در این روش ماده ای به نام کوماسی برلیان بلو 250 G با پروتئین ها کمپلکس آبی رنگی تشکیل میدهد که در طول موج 595nm جذب دارد. این روش بسیار دقیق است و میتوان پروتئین تا غلظت 2 را اندازه گیری کرد. این روش معمولا در آزمایشگاه های تحقیقاتی برای سنجش دقیق پروتئین ها استفاده میشود.
3. بیوره :
اساس روش بیوره این است که یون مس دو ظرفیتی ( cu2) در محیط قلیایی با عامل آمین پیوند های پپتیدی، کمپلکس آبی رنگی ایجاد میکند که در طول موج 540nm جذب دارد.
به دلیل اینکه مولکول بیوره نیز همین کمپلکس آبی را با cu2 تشکیل می دهد، این آزمایش بیوره نام دارد.
روش کار :
کیت بیوره دارای یک معرف است که حاوی سود برای قلیایی کردن محیط و سولفات مس برای تأمین مس مورد نیاز برای تشکیل کمپلکس میباشد.
طبق جدول زیر محلول ها را در لوله های آزمایش مخلوط کنید.
محتویات لوله ها را مخلوط کرده و پس از قرار دادن در دمای 37 به مدت 15 دقیقه، جذب لوله های TETS و استاندارد را در مقابل بلانک در طول موج 540nm قرائت میکنیم.
مقدار نرمال پروتئین سرم در نوزادان 9/1 – 5/2gr/dl است. برای بزرگسالان 8/3 – 6/4gr/dlاست. این تست برای غلظت های کمتر از 1gr/dl حساس نیست. بنابراین از آن برای اندازه گیری پروتئین ادرار و مایع نخاعی نمیتوان استفاده کرد.