نکات آزمایشگاهی

[bahar9368]

سلام

بیاین معلوماتمونو share کنیم

اینجا جاییه برا صحبت در مورد نکات آزمایشگاهی و اینکه آزمایش های هر بخشو بشناسیم .هر کس اطلاعاتی در مورد تست ها و نکات و تفسیر، کنترل کیفی و .... داره بیاد بگه تا همه استفاده کنیم .

کسی اگه سوالی براش پیش میاد هم بپرسه دوستانی که میدونن جواب بدن .

 

[susan90]

آفریییییییییین .... واقعا کار خوبی کردین .... :thanks:متاسفانه جدیدا دعوای بین رشته ای زیاد شدهt0837h0nn8zfqu8ult در حالی که آزمایشگه .....

 

[BBT]

ممنون بابت تاپیک خودبتون
امیدوارم بحثاش به صورت فعال دنبال بشه

 

[bahar9368]

ممنون بابت تاپیک خودبتون
امیدوارم بحثاش به صورت فعال دنبال بشه

مرسی .منم امیدوارم دوستان بیان بحث علمی داشته باشیم و به اطلاعاتمون اضافه بشه .

 

[konjkave]

سلام بهار جون ایده فوق العاده خوبی.ایشالا که بتونیم به معلومات همدیگه اضافه کنیم

 

[hematology70]

تست حاملگی
B hcg
این تست یکی از تست های بخش هورمون شناسی می باشد تقریبا تمام متخصصان زنان و زایمان این تست را در صورت وجود شکم درد یا علایم بارداری در زنان مینویسن
یک توصیه که ئحاصل تجربه خودمه حتما حتما قبل از انجام این تست شرح حال بگیرید

 

[Tarsa]

تست های تشخیصی مهم مثل هپاتیت و hiv هم جالبه نکات و خطاهاش مطرح شه چون همه میگن الایزا به قولی واردی میخواد!

 

[vfarhadv]

چرا دکتر بررسی RBC های dismorph رو تو UA درخواست می کنه؟

 

[محسن ن ک]

در صورت نداشتن روغن امرسیون و استفاده ا لنز 100 باید چیکا کنیم؟
کف ادرار علتش چیه؟
چرا برای تعویض خون نوزاد از خون مادر کراس مچ گرفته میشود؟

 

[محسن ن ک]

افتراق تالاسمیه ماژور و مینور زیر میکروسکوپ چیه؟ از روی سی بی سی که 2تاشون یه جون..ام سی وی تقسیم بر ار بی سی..بیشتر از 13 تالاسمی (هم ماژور هم مینور)..کمتر ا 13 هم فقر اهن

 

[محسن ن ک]

منحنی ار بی سی اگر 2 تا قله (برامدگی) داشته باشه چه دلایلی ممکنه داشته باشه؟

 

[نوشین]

من هم اومدم . تاپیک جالبیه . امیدوارم بتونیم اطلاعاتمون را گسترش بدیم

 

[bahar9368]

چرا دکتر بررسی rbc های dismorph رو تو ua درخواست می کنه؟

شاید احتمال سرطان مثانه رو در نظر گرفته .چون خطرناک ترین فرم RBCدر ادرار فرم crenated میباشد و وقتی تو مثانه بمونه احتمال سرطان مثانه بالا میره.
یا آسیب های گلومرولی مثل گلومرولونفریت مد نظرش بوده .

زمانی که با هماچوری مواجه هستیم یکی از دغدغه های ذهنی پزشک اینه که مشخص کنه که منشاه این خون بدلیل بیماری گلومرول است یا بیماری های غیر گلومرولی. یکی از مواردی که پزشک را به سمت وجود آسیب های گلومرولی سوق میده وجود همین گلبول دیسمورفه.

 

[vfarhadv]

شاید احتمال سرطان مثانه رو در نظر گرفته .چون خطرناک ترین فرم bbc در ادرار فرم crenated میباشد و وقتی تو مثانه بمونه احتمال سرطان مثانه بالا میره.
یا آسیب های گلومرولی مثل گلومرولونفریت مد نظرش بوده .

زمانی که با هماچوری مواجه هستیم یکی از دغدغه های ذهنی پزشک اینه که مشخص کنه که منشاه این خون بدلیل بیماری گلومرول است یا بیماری های غیر گلومرولی. یکی از مواردی که پزشک را به سمت وجود آسیب های گلومرولی سوق میده وجود همین گلبول دیسمورفه.

درود کاملا درسته

 

[bahar9368]

جهت یادآوری:
بررسی های میکروسکوپی ادرار شامل این موارده:RBC-WBC-EPITHELIAL-cast-crystal-yeast-oval-sperm


بررسی RBC :بین سه تا پنج فرم در ادرار دیده میشود
1-FEREFH :کاملا بزرگ و به اندازه wbc میباشد .در قسمت پایین دستگاه ادراری دیده میشود
2-old:کوچک و زرد رنگ که با مخمر اشتباه میشود .منشا قسمت بالای مجرای ادراری میباشد.
3-small:کوچک اما زرد رنگ نیست .مثلا در نوزادی که تنگی مجرای ادراری دارد دیده میشود .قابل اشتباه با مخمر
4-crenated:زرد رنگ و خطرناک ترین نوع .
5-ghost cell:
RBC که درون آن خالی شده باشد و به شکل هاله ای میباشد .در مورد هموگلوبینوری دیده میشود .تشخیص این نوع سخت میباشد .اگر نوار مثبت شد انقدر فوکوس را تغییر میدهیم تا هاله را ببینیم در این مورد سایز مهم نیس.

 

[bahar9368]

تست های تشخیصی مهم مثل هپاتیت و hiv هم جالبه نکات و خطاهاش مطرح شه چون همه میگن الایزا به قولی واردی میخواد!

منظورت خطاهای کار با الایزاس؟

 

[Tarsa]

آره چون خیلی خطا میتونه داشته باشه

 

[bahar9368]

آره چون خیلی خطا میتونه داشته باشه[
[FONT=&quot]منابع خطا در روش های الایزا
[/FONT]
خطاها در آزمون الایزا:


جمع آوری و نگه داری نمونه:
بستن طولانی مدت گارو
جداسازی سرم به نحوی که حاوی فیبرینوژن یا ذرات دیگرنباشد
درصورت استفاده از پلاسما درصورت ناکافی بودن سرم باید به نوع ضد انعقاد توجه کرد



EDTA:مهار Zn که کوآنزیم آلکالین فسفاتاز است.
فلوراید سدیم: تداخل در تست هایی که از آنزیم اوره آز به عنوان نشانگر استفاده میشود.
سدیم آزاید:مهار کننده قوی پراکسیداز است .

نمونه لیز و لیپمیک نباشد.
از فریز و دفریز کردن نمونه ها جلوگیری شود زیرا باعث کاهش سطح هورمونهای سرم بویژه T4و FT4 میشود.
نگهداری کیت آزمایش در دمای 2-8 C.
پایداری هورمون های LH، FSH،PRL،T3،T4،TSH در دمای یخچال به مدت یک هفته و در دمای -20به مدت چندین ماه.



کنترل کیت مصرفی از لحاظ اعتبار کمپانی سازنده ،بسته بندی مناسب،موجود بودن تمام استاندارد ها و کنترل های مثبت و منفی.
کنترل ابزار های حجمی و سمپلر
اطمینان از کارکرد صحیح دستگاه ها و تجهیزات مثل الایزا ریدر و دستگاه واشر.
آماده سازی بافر یا محلولهای شستشو .

نکات در مورد شروع کار با الایزا :

تمام محلولهای کیت باید به دمای آزمایشگاه برسند و خوب مخلوط گردند.
اجزای کیت باید از نظر کدورت و آلودگی بررسی شوند.
پاکت حاوی میکروپلیت باید به دمای آزمایشگاه برسد و بعد درب آن باز گردد.
در پايان هر يك از مراحل، (مطابق دستور العمل كيت) عمل بهم‌زدن و مخلوط نمودن محتويات چاهكها بايد به آرامي صورت گيرد، تا از ايجاد حباب يا انتقال محلول از يك چاهك به چاهك‌هاي مجاور جلوگيري شود.
جهت كنترل كيفي و اطمينان از سالم بودن سوبسترا و كونژوگه مي‌توان حجم‌هاي مساوي از اين دو را با هم مخلوط نمود در اينصورت رنگ حاصله بايستي بسرعت ايجاد شود.
محلول سوبستراي آماده كار بايد در هر نوبت كاري تهيه شده و از مخلوط نمودن محلول تازه با محلول قبلي جلوگيري شود.
از ايجاد خراش، برجا ماندن اثر انگشت و همچنين لبريز شدن محلول در سطوح زيرين چاهكها جلوگیری گردد.
كليه مراحل مطابق روش كيت مورد استفاده و بطور پيوسته و بدون انقطاع، بايد صورت گيرد تا از خشك شدن ميكروپليت پس از شستشو و همچنين آلودگي آنها جلوگيري شود.
جهت كنترل كيفي و اطمينان از سالم بودن سوبسترا و كونژوگه مي‌توان حجم‌هاي مساوي از اين دو را با هم مخلوط نمود در اينصورت رنگ حاصله بايستي بسرعت ايجاد شود.
محلول سوبستراي آماده كار بايد در هر نوبت كاري تهيه شده و از مخلوط نمودن محلول تازه با محلول قبلي جلوگيري شود.
از ايجاد خراش، برجا ماندن اثر انگشت و همچنين لبريز شدن محلول در سطوح زيرين چاهكها جلوگیری گردد.
كليه مراحل مطابق روش كيت مورد استفاده و بطور پيوسته و بدون انقطاع، بايد صورت گيرد تا از خشك شدن ميكروپليت پس از شستشو و همچنين آلودگي آنها جلوگيري شود.
از نوسانات غير تدريجي دما در هنگام انكوباسيون، مانند باز بودن پنجره يا درب آزمايشگاه در محل آزمايش جلوگیری نمائیم.
دقت در مراحل مختلف شستشو و عدم باقيماندن ذرات كونژوگه آنزيمي در كف چاهكها
توجه داشته باشید ، در صورت كريستاله شدن محلول شستشو، بايد قبل از مصرف آنرا در دماي 37 حل نمود
جلوگيري از تبخير چاهك در مدت زمان انكوباسيون با استفاده از پارافيلم يا چسب‌هاي مناسب و يا استفاده از محفظه مسدود حاوي پنبه آغشته به آب مقطر ضروري است.
هيچگاه از محلو‌ل‌هايي كه با سري ساخت متفاوت و يا داراي اجزاي تاريخ گذشته هستند، استفاده نشود.
بايد توجه داشته ‌باشيم كه ايجاد پديده هوك (Hook Effect) باعث ايجاد نتايج پائين كاذب مي‌شود لذا توصيه مي‌شود براي جلوگيري از اين پديده سرم رقيق نشده و سرم یک دهم رقیق شده، مخلوط وآزمایش را انجام دهيم، تا اثر احتمالي هوك اصلاح شود.
يكي از مراحل مهم انجام تست‌هاي الايزا شستشو مي باشد نكات مهم اين مرحله شامل: :
فشار بالاي شستشو در روش دستي‌ناشي از تخليه سريع بافر مي‌باشد كه منجر به جدا‌سازي و حذف اتصالات اختصاصي از كف چاهكها و كاهش كاذب (OD) مي‌گردد.
فشار پائين‌شستشو بعلت تخليه آهسته بافر در روشهاي دستي منجر به عدم دفع كامل اتصالات غير اختصاصي و افزايش كاذب جذب نوري (OD) مي‌گردد.
در نظر گرفتن زمان خيس خوردن (Soaking Time) چاهك، در فواصل شستشو(مكش و تخليه) الزامي است، و معمولاً بين 40-20 ثانيه مي‌باشد، اين مرحله به جداسازي و دفع كامل اتصالات غير اختصاصي كمك مي‌نمايد.
براي شستشو بروش دستي(با سمپلر) جهت جلوگيري از آسيب فيزيكي به چاهك الايزا و جداسازي كمپلكس‌هاي پوشيده شده در كف چاهك سعي كنيد تخليه نمونه بطور مايل صورت گيرد.
در پروسه شستشو بهتر است تا نزديك لبه فوقاني چاهك از محلول شستشو پر شود، پر كردن لبالب محلول شستشو در چاهكها احتمال آلودگي چاهك به چاهك را افزايش مي‌دهد. (حجم 300μl حجم مناسبي است
نكته مهم در شستشوي دستي و با سمپلر، جلوگيري از ايجاد حباب هوا در چاهكها و جلوگيري از سرريز شدن محلول شستش
و و نیز تماس با كف چاهك‌مي‌باشد كه نهايتاً منجر به كاهش كاذب OD مي‌گردد.
محلول شستشو PBS(بافر فسفات سالين) يكي از مناسب‌ترين محلول‌هاي ايزوتونيك شستشو دهنده مي‌باشد كه كمترين اثرات تخريبي روي كمپلكس Ab-Ag در سيستم‌هاي الايزا را دارد.
در شستشو به روش دستي در مرحله مكش، چاهك‌ها بايستي بطور كامل تخليه شوند، و هيچ قطره اضافي از مايع بافر در كف چاهكها باقي نماند كه اين كار با برگرداندن يكباره ميكروپليت روي كاغذ جاذب و بدون پرز انجام مي‌گردد، خشك نمودن بيش از حد و طولاني مجاز نمي‌باشد.
توصيه مي‌شود جهت شستشوي سريعتر و راحت‌تر و دسترسي به نتايج دقيق‌تر از واشر الايزا استفاده شود.
توقف واكنش و قرائت جذب نوري با ميكرو پليت ريدر :
توقف كامل واكنش آنزيمي و جلوگيري از افزايش رنگ محيط آنزيمي پس از افزودن محلول اسيدي (Stopping) بستگي به تكان دادن كافي و كامل (Shaking) ميكروپليت‌ها دارد. تكان شديد باعث آلودگي چاهك به چاهك شده و تكان آهسته يا بكارگيري روتاتور معمولي با قطر چرخش زياد و تعداد دور كم باعث عدم اختلاط خوب معرفها و منجر به ادامه و پيشرفت جزئي واكنش در طي زمان در نتيجه تغيير OD و بروز خطا میشود.

جهت رفع مشكلات فوق توصيه مي‌شود از شيكرانكوباتور الايزا استفاده گردد.

خوانش ميزان جذب محتوي چاهكها توسط الايزا ريدر الزاماً بايستي در زمان تعيين شده انجام شود.

 

[mamai86]

vdrl ؟؟؟؟؟؟؟

 

[bahar9368]

آزمایش غیر اختصاصی تشخیص سفیلیس (VDRL )

در بیماران مبتلا به سفلیس ،نوعی آنتی بادی ایجاد میشه که بطور غیر اختصاصی قادره به فسفولیپیدهای بسیاری از بافت ها ،نظیر کاردیو لیپین قلب گاو متصل شود،که به آن،آنتی بادی رآژین سفلیسی ،آنتی لیپوئیدال و آنتی بادی wasserman میگن و از IGM هستش.

در آزمایش VDRL و RPR با استفاده از آنتی ژن VDRL که مخلوطی از کاردیو لیپین و کلسترول و لستین هستش به جستجوی وجود یا عدم وجود آنتی بادی رآژنیک سفلیسی میگردن .از این تست به عنوان غربالگری استفاده میشه .
اگر این ازمایش برا فرد به دفعات منفی شد ارزش زیادی داره و فرد مبتلا به سفلیس نیست.ولی اگر آنتی بادی رآژین سفلیسی مثبت شد باید علت ان جستجو شود.





روش انجام آزمایش VDRL :

یک قطره از سرم بیمار را بر روی یک لام ریخته وبه آن مقدار مشخصی از آنتی ژن VDRL (مخلوطی از کاردیولیپین و لسیتین و کلسترول) اضافه نمایید .
دو قطره را با اپلیکاتور با یکدیگر مخلوط کرده وبعد چند دقیقه حرکت دورانی لام را زیر میکروسکوپ با لنز 10 از نظر واکنش فلوکولاسیون بررسی کنید
واکنش زیر میکروسکوپ به صورت تجمعات سوزنی شکلی مشاهده میشه .
بر اساس شدت واکنش جواب آزمایش را از منفی تا +4 گزارش میکنیم